免疫分析的原理

这些测定的基本原理是抗体-抗原反应的特异性。 免疫分析有几种不同的形式(请参见下文“免疫分析的类型”),但所有形式都涉及与其抗原结合的特异性抗体和用于检测抗原-抗体复合物的标记。

标记可以与结合抗原的一抗,与一抗结合的二抗或与添加到样品中并与待测抗原竞争的一部分抗原连接。 为了将结合部分与游离部分分离,需要至少一个洗涤步骤。 分析工作站通常用于自动化过程,因为免疫检测通常涉及多个清洗,分配和孵育步骤。

免疫分析的类型

按信号分类的免疫分析

对免疫分析进行分类的一种有用方法是根据所测信号的类型分类,因为这会影响其灵敏度以及测量其所需的仪器。免疫测定的最常见类型是:

  • ELISA(酶联免疫吸附测定),该信号由酶产生有色底物,使用光吸收进行测量。这些通常使用ELISA读数仪或在使整个分析自动化的ELISA工作站中进行测量。ELISA是最常见的免疫分析方法,但ELISA的灵敏度有限,可以通过采用更灵敏的检测方法加以改进。
  • FIA(荧光免疫分析),信号由荧光染料(例如FITC)提供,并且使用微孔板荧光仪进行测量。
  • CLIA(化学发光免疫分析)信号是由一种酶催化反应产生的光,并使用发光仪进行测量。发光是提供最高灵敏度的检测方法之一。
  • RIA(放射免疫分析)信号是由来自放射性同位素(例如125I)的辐射提供的。由于它们通常是发射伽玛的同位素,因此通常使用伽玛计数器进行测量。辐射是提供最高灵敏度的另一种检测方法。
  • 较新的检测技术也已应用于免疫分析,例如TRFAlpha技术

按方法分类的免疫分析

存在几种不同的免疫分析形式,这取决于形成什么抗原-抗体复合物以及在哪里定量信号。 由于术语来自最常用的免疫分析,ELISA,因此通常用各自ELISA形式的名称来称呼它们:

  • 直接ELISA:标记的抗体直接结合目标抗原。
  • 间接ELISA:标记的抗体结合目标抗体,该抗体与固定的抗原结合。
  • 夹心ELISA:目标抗原捕获在固定的抗体和标记的抗体之间。
  • 竞争性ELISA:样品抗原与抑制剂抗原竞争,与有限量的标记抗体结合。

您可以在我们的ELISA方法页面中找到有关免疫分析方法的更多信息。

免疫分析的应用

免疫分析广泛用于研究,药物开发和诊断中,以高度特异性和经济有效的方式检测分析物,包括但不限于:

  • 肿瘤标记物,例如 AFP,CEA,hCG,PSA ...
  • 心脏标记,例如 CK-MB,CRP,地高辛,肌红蛋白…
  • 基于细胞的检测. 例如细胞毒性…
  • 过敏,例如 组胺,鸡蛋,牛奶,杏仁...
  • 生长缺陷,例如 生长激素
  • 酶活性
  • 激素和类固醇筛查,例如 T4,fT3,TSH ...
  • 药物滥用筛查,例如 苯丙胺,可卡因,LSD…
  • 免疫筛查
  • 传染病,例如 衣原体,巨细胞病毒,肝炎,风疹…
  • 兽医,例如 细菌感染,生育力,药物,疯牛病…
  • 食物和饮料,例如 病原体,毒素……
  • 水分析,例如 细菌污染,毒素,重金属...
  • 农业,例如 内毒素,农药…
  • 环境,例如 工业化学品,农药,表面活性剂… 

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