相声是什么?

在微孔板测量领域,孔间干扰是指微孔板的井中产生的信号是否停留在特定的井中而不干扰相邻井的信号。这可能会导致人为的信号升高,并在分析低信号样本与高信号样本相邻时提出了一个重大问题。典型的解决方案是尝试将高信号样本从其他样本中分离出来,以尽可能地避免孔间干扰,但这是在浪费宝贵的井,当您的吞吐量很高时,这不是一个选项。那么,您应该考虑什么来减少您的实验中的孔间干扰呢?

测定对孔间干扰的影响

一般来说,检测的信号强度是一个重要的考虑因素。像化学发光法这样的分析方法可以产生相对高的信号,导致显著的孔间干扰。此外,发出的光的波长是另一个需要考虑的因素。发射的波长越短,它的能级就越高,这将使您的实验更容易产生孔间干扰。

另一方面,荧光测定法不太容易发生孔间干扰,因为通常只有被测孔被激发光照亮,而且荧光寿命很短(即时荧光测定法以纳秒为顺序)。

还有两个影响孔间干扰的重要因素:一方面,所使用的微孔板对您所观察到的孔间干扰水平有显著的影响;另一方面,有几个仪器的设计考虑因素将影响孔间干扰的水平。

微孔板对孔间干扰的影响

用于试验开发和高通量筛选的微孔板通常由聚苯乙烯聚合物制造。对于白色板,添加了光学增白剂,二氧化钛。这是为了增加反射率,使井内表面非常光滑明亮。以下总结了影响孔间干扰水平的一般板设计考虑因素:

 

孔板塑料和彩色

  • 黑色微孔板的孔间干扰量最低,其次是浅灰色微孔板

  • 白色微孔板孔间干扰电位随所用二氧化钛的水平而变化,但一般为中等

  • 透明的微孔板可以产生最高的串音,因为光可以自由地穿过孔壁,并且不应该用于任何发光试验

微型板块设计

井的几何形状、井与井的距离以及相邻井的壁厚和井的底部都对所观察到的孔间干扰水平有影响。

Berthold Technologies提供最适合于发光、荧光和吸光度测量的微孔板

 

乐器对串音的影响

高性能的微孔板读入器通常具有将孔间干扰降低到可以忽略的水平的技术。总的来说,光学通道的各个组成部分的排列已经被优化,以避免相邻井的信号在被分析的井中被测量。此外,物理掩蔽装置已被应用于将被测井与邻井隔离开来。

在Berthold Technologies,我们拥有专利设计,可以消除未测量井的信号,根据选择的板型自动定位。我们所有的微孔板阅读器都有这个功能。我们大多数读书机的串音规范是10-6。这相当于在特定的井中有1,000,000个计数,而在所有相邻的井中只有1个计数。在其他制造商的平板读数器中,我们看到相邻井的读数从100到5000多个不等。如您所见,智能仪器设计可以有效地减少相邻井之间的物理孔间干扰,几乎不存在样本对样本的孔间干扰。