昼夜节律

内源性生物钟决定了每天的节律,使生物体能够预测环境变化,并以同步的方式协调和适应其生理状况。昼夜节律钟使植物能够预测和应对环境变化,从而提高它们的生存能力。环境和新陈代谢信号为这个由基因网络组成的时钟提供能量,并使其与日/夜周期保持同步。作为回报,时钟控制各种途径,并确保它们在一天中的正确时间被激活。光是所谓的Zeitgebers之一,它可以重置时钟。

昼夜节律研究中的体内成像

昼夜节律研究得益于实时监测报告线,其中感兴趣的基因的启动子驱动荧光素酶pGENE::LUC+的表达,并与敏感的成像系统相结合。使用体内成像系统监测萤火虫荧光素酶的表达,可以非侵入性地实时报告受调控的基因表达。这种技术广泛适用于转录、转录后或翻译调节的分析。此外,荧光素酶活性的不稳定性使生物发光标记物能够再现几个小时内表达的增加和减少。通过这种方式,可以研究昼夜节律钟的组织浓度及其特点,或选择在感兴趣的基因表达的空间调节方面有缺陷的突变体。

夜幕降临

NightShade 体内成像系统使用低噪音、高灵敏度的CCD相机,适用于发光和荧光。NightShade是专门为植物成像而设计的,与通用相机或为动物研究设计的成像系统相比,它有几个优点。

  • 具有灵活的光线质量和强度的日光模拟。
  • 直观的软件带有强大的编程器,可以对所需的光照强度和质量进行编程,并在所需的时间点采集图像。
  • 用于插入灌溉软管(对几天的图像拍摄至关重要)和其他用途的不透光的端口。
  • 灵活的样本量:从培养皿中生长的小苗到盆栽。
  • 侧面安装的相机位置,用于捕捉整个植物的图像,从叶片到根部。
  • 带温度控制的防凝结托盘,在使用培养皿时可获得高质量的图像。

 

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应用说明

在多细胞生物体中,昼夜节律钟在个体、组织和细胞水平上是自然可变的,从而导致数据的嘈杂或不准确。因此,要准确解决昼夜节律生物学的关键问题,需要一定的稳健性。本应用说明介绍了使用NightShade对拟南芥报告品系进行昼夜节律实验的简单方案,该方案可以提高数据质量,减少重复间的发光变化,并与模型预测有很高的相关性。

 

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