时间分辨FRET将时间分辨方法与经典FRET相结合，可创建具有高稳定性和灵敏度的测定方法：

  • FRET（荧光共振能量转移）基于以下事实：处于激发态的供体染料（例如CFP）可以将其部分能量转移到像YFP这样的受体分子上。当两种蛋白质发生相互作用后，两种染料非常接近，就可以检测到受体发出的光。传统FRET分析的性能通常受到样品成分的背景荧光的阻碍，但是这种类型的背景荧光非常短暂（寿命在纳秒范围内），因此可以使用时间分辨方法消除。
  • 时间分辨荧光（TRF）使用荧光寿命很长的荧光团，以避免荧光寿命短的分子或其他因素（如激发光）引起的干扰。选择的荧光团通常是镧系元素的螯合物（最常见的是Eu、Ter和Sa）。


HTRF®是TR-FRET的强大变体。

    TR-FRET的应用

    作为FRET的替代品，TR-FRET通常用于研究蛋白质之间的相互作用。 已经开发了许多测量两个大分子之间结合的其他分析方法。 

     

    Transcreener® GDP TR-FRET Red Assay with Mithras² Validation of the Mithras² Multimode Microplate Reader with the Transcreener® GDP TR-FRET Red assay

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    Transcreener® GDP TR-FRET Red Assay with TriStar² S Validation of the TriStar² S Multimode Microplate Reader with the Transcreener® GDP TR-FRET Red assay

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    cAMP/IP-One HTplex HTRF® assay with Mithras cAMP/IP-One HTplex cell-based experiment performed on Mithras LB 940 Multimode Microplate Reader using HTRF® technology

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    推荐用于TR-FRET的微孔板读数仪

    能够使用滤光片测量高灵敏度荧光并配备闪光灯的微孔板读数仪是TRF的最佳组合（也可以使用基于光栅的仪器，但性能较低）。 对于某些应用，可能需要光谱范围超过650 nm的检测器。 例如，一些流行的TR-FRET分析可在665 nm处测量Eu标记。 推荐将微孔板读数仪用于TR-FRET。

    HTRF®是Cisbio Bioassays的注册商标。